TGEV双基因嵌合表达质粒pVAX-S-N的构建及体外表达
采用RT-PCR扩增猪传染性肠胃炎病毒(TGEV)SC-H株S基因5′端主要抗原位点片段和N基因,插入pMD19-T载体,经酶切与测序鉴定后,构建重组质粒19T-N与19T-S.从T载体上将S、N基因切下,以亚克隆方法插入真核表达载体pVAX1,构建嵌合表达S、N基因的重组质粒pVAX-S-N.对重组质粒PCR与酶切鉴定后,以脂质体转染法转染COS7细胞,间接免疫荧光检测转染后细胞外源基因的表达情况.结果表明,重组质粒构建正确且在COS7细胞中得到表达,转染的细胞呈现特异性荧光.真核表达质粒pVAX-S-N的成功构建为进一步研究TGEV核酸疫苗奠定了物质基础.
猪传染性胃肠炎病毒、S基因、N基因、构建、真核表达
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S852.65(动物医学(兽医学))
教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目IR-T0555
2009-05-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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