金黄色葡萄球菌ClfA基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
根据GenBank中ClfA基因序列设计特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,进行PCR扩增,获得了约2 300 bp的DNA片段.将PCR产物克隆至pMD18-T载体中,构建了克隆质粒pMD18-ClfA.用BamHⅠ和EcoR Ⅰ双酶切pMD18-ClfA和pET28a(+),将纯化的基因ClfA亚克隆至pET28a(+),构建重组质粒pET28a-ClfA,并将其转化至大肠杆菌感受态BL21(DE3)中,经1 mmol/L IPTG诱导和SDS-PAGE分析,在87 000处出现了与目的蛋白一致的外源蛋白带,Western-blotting分析表明,该蛋白具有金黄色葡萄球菌的抗原性.
金黄色葡萄球菌、ClfA基因、克隆、原核表达
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S852.611(动物医学（兽医学）)
国家自然科学基金资助项目30771596;教育部博士点基金资助项目20060183010
2009-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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