猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白和SEA共表达核酸疫的构建及鉴定

摘要：

构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白和金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)共表达的核酸疫苗,并研究其表达产物的抗原性.将采自长春患PRRS病猪的组织剪碎充分研磨,提取病毒RNA后,用RT-PCR的方法特异性扩增PRRSV长春株的ORF6基因(M蛋白)片段.将该片段定向插入到载体pKS-SEA上,双酶切获得片段SEAORF6,再将其克隆到真核表达载体pVAXⅠ中,构建重组质粒pVAXⅠ-SEA-ORF6,转化大肠杆菌.经酶切鉴定后,将构建的阳性重组质粒在BHK细胞中表达.通过间接免疫荧光方法初步检测所表达蛋白的抗原性,用Western blot分析表达蛋白的特异性.结果表明,所构建的重组质粒pVAXⅠ-SEA-ORF6在BHK细胞中得到了表达,为进一步研究PRRSV基因工程疫苗奠定了基础.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征、表达、核酸疫苗

所属期刊栏目：28

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：吉林省科技发展计划20060554

在线出版日期：2008-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：9-11