实时荧光定量RT-PCR检测中、强毒力新城疫病毒RNA

摘要：

根据新城疫病毒(NDV)核苷酸序列,设计针对中、强毒力NDV F基因编码融合蛋白裂解位点的核苷酸序列引物和TaqMan探针,建立了实时荧光定量反转录荧光定量PCR(RRT-PCR)检测中、强毒力NDV RNA的方法.该方法能从含有NDV Ⅰ系疫苗毒、NDV标准强毒株F48E9(基因Ⅸ型)、分离鸡源强毒株(基因Ⅶ型)和鸽源强毒株(基因Ⅵ型)样本中检出NDV RNA,不与NDV弱毒株(LaSota、Clone 30、B1、V4)、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊炎病毒及健康鸡组织RNA发生交叉反应,对NDV核酸的最小检出量为60个拷贝,具有检测速度快、特异性强、灵敏度高、重复性和稳定性好等特点.从9个临床样本中均检测出阳性信号(9/9),PCR产物经测序证明均含有NDV强毒株F基因裂解位点;用其中8份病料接种SPF鸡胚分离病毒,分离率为5/8.

关键词：鸡新城疫病毒、毒力、荧光定量RT-PCR、诊断

所属期刊栏目：27

分类号：Q78;S852.65(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家科技攻关计划2004BA519A58

在线出版日期：2007-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：300-304