猪瘟RT-PCR ELISA诊断方法的建立

摘要：

将RT-PCR方法和高灵敏度的地高辛检测系统相结合,先建立猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)的RT-PCR方法,用地高辛标记RT-PCR产物;再建立CSFV的PCR-ELISA方法,用生物素标记的探针在链亲和素包被的微量板孔中杂交捕获地高辛标记的PCR产物,最后进行免疫显色得出结果.试验主要对RT-PCR ELISA的各种反应条件进行了优化,确定了1 mg/L的链亲和素、50μg/L生物素标记的探针、1:3000抗地高辛的过氧化物酶、37C杂交2 h等为最适反应条件.该方法的敏感性比常规琼脂糖凝胶电泳检测高100倍以上,克服了组织样品中CSFV含量少而难以检测的困难,为猪瘟的早期诊断和分子流行病学调查提供了一条新途径.

关键词：猪瘟病毒、RT-PCR ELISA、诊断

所属期刊栏目：27

分类号：Q78;S852(基因工程（遗传工程）)

资助基金：北京市科委科研项目H030730250190

在线出版日期：2007-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：292-295