10.3969/j.issn.1005-4545.2007.01.001
嵌合猪圆环病毒PCV2-1感染性克隆的构建
根据GenBank中发表的猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)的核苷酸序列.设计3对特异性引物.通过PCR方法,以引物P1和P2从接毒细胞中扩增到猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)全基因组,克隆入pBluescript Ⅱ SK(+)载体构建质粒SK-PCV2,以之为模板,用引物P5和P6扩增不包含PCV2-ORF2的部分基因(SK-PCV2△ORF2);另一对引物P3、P4用于特异性扩增猪Ⅰ型圆环病毒(PCV1)的ORF2基因,与前面得到的SK-PCV2△ORF2基因连接,构建嵌合型质粒SK-PCV2-1,以此为基础构建双联体质粒SK-PCV2-1(DB).体外转染PK-15细胞,盲传4代后,用RT-PCR和间接免疫荧光方法检测,结果表明本试验构建的嵌合病毒PCV2-1克隆具有感染性.
嵌合猪圆环病毒、感染性克隆、构建、鉴定
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S852.65(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金36170701
2007-03-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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