伪狂犬病病毒PK基因的克隆与PK、gG双缺失转移载体的构建

摘要：

地高辛标记伪狂犬病病毒(PRV)Ea株短区段蛋白激酶(PK)基因3'端0.4 kb片段,Southern杂交确定短区段PK基因定位在基因组DNA BamH I 4.0 kb片段中.将该片段克隆获得重组质粒pSB304.对pSB304亚克隆,构建了仅含完整PK基因约1.3 kb片段的重组质粒pSB305,并进行了序列测定.结果表明,PK基因存在2种可能的同框编码方式,分别编码388或334个氨基酸残基,并具有真核细胞蛋白激酶催化结构域序列.同国外PRV NIA-3、Ka株相比,氨基酸同源性分别为98.8%和97.3%,有意义的是Ea株、Ka株均较NIA-3株在同一位置缺失2个氨基酸(Asp,Gly).进一步对pSB305和含gG全基因以及部分gD基因的质粒pUSK进行酶切拼接,将PK基因大部分编码区、gG基因5'端部分编码区进行缺失,构建成两端同源侧翼分别为3.1 kb和1.6 kb的PK、gG双缺失转移载体pLR001.上述结果为深入研究PK基因功能及研制更安全的TK-/PK-/gG-三缺失基因工程疫苗奠定了基础.

关键词：伪狂犬病病毒、PK基因、序列分析、缺失、转移载体

所属期刊栏目：26

分类号：S852.61;Q78(动物医学（兽医学）)

资助基金：中国科学院资助项目39970559;国家科技攻关项目96-C01-04-03

在线出版日期：2006-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：169-172,179