猪Ghrelin基因的克隆及原核表达

摘要：

从猪下丘脑、胃等组织中提取总RNA,根据已发表的猪的Ghrelin mRNA序列设计合成引物,通过RT-PCR进行cDNA扩增,获得了282 bp的片段.将该片段克隆于pMD-18T载体后进行序列分析,确认PCR产物为Ghrelin cDNA.从阳性克隆中提取质粒,经Nhe Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切,回收282 bp的目的片段,定向克隆到pET-28a表达载体中,提取质粒并再次转化到BL21(DE3)中,成功地筛选出阳性克隆.经IPTG诱导阳性菌,通过SDS-PAGE检测出猪Ghrelin基因的表达.

关键词：Ghrelin、基因克隆、原核表达、猪

所属期刊栏目：25

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中国科学院资助项目30170713;吉林省教育厅资助项目200401

在线出版日期：2005-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：614-616