抗猪圆环病毒Ⅱ型ORF2蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要：

利用本室构建的质粒PGEXORF2转化BL21(DE3),经IPTG诱导表达,得到PCV2-ORF2的重组蛋白,经复性纯化后作为免疫原,采取常规免疫与体外脾脏免疫结合的方式免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0的骨髓瘤细胞融合,经间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选,获得了2株抗PCV2-ORF2蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3B2F4和9C3D2,其细胞培养上清效价分别为1:1024、1:512,小鼠腹水效价分别为1:204 800、1:102 400.ELISA结果显示,3B2F4和9C3D2仅与融合表达的PCV2-ORF2蛋白反应,而与PGEX-KG表达的蛋白、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)不反应,说明此2株单抗特异性好.间接免疫荧光结果显示,3B2F4和9C3D2能与PCV2发生反应,而不与PCV1发生交叉反应,表明所获得的2株单抗是PCV2型特异性的.这2株单抗的获得为进一步研究PCV2-ORF2基因的功能,及建立准确快速的鉴别PCV1和PCV2的诊断方法提供了强有力的手段.

关键词：猪圆环病毒Ⅱ型、ORF2蛋白、单克隆抗体

所属期刊栏目：25

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：中国科学院资助项目30170701

在线出版日期：2005-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：567-569