抗猪SIgA单克隆抗体的研制

摘要：

采用饱和硫酸铵盐析、SephadexG-200柱层析和离子交换柱层析技术,从猪初乳中提纯分泌型IgA(SIgA).经SDS-PAGE电泳鉴定,纯化的SIgA达到电泳纯.以此纯化的SIgA,采用长程免疫法免疫BALB/c小鼠,取4次免疫后的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞用PEG-1500进行细胞融合,第1次融合率为79.7%,第2次融合率为60.3%.建立间接ELISA,用于检测杂交瘤细胞上清中的单克隆抗体,初检阳性率分别为4.1%、16.8%.经2次亚克隆反复筛选获得了2株能稳定分泌抗猪SIgA单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为CA6、5D4.ELISA和Western-blotting证实,所获得的单抗能特异性针对SIgA.CA6、5D4经反复冻存、复苏及多次传代,仍能分泌高效价抗体,CA6分泌抗体属IgM、κ型,而5D4分泌抗体属IgGl、κ型.

关键词：猪SIgA、单克隆抗体、层析技术

所属期刊栏目：25

分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金30270990;江苏省高新技术项目BG2002317;教育部留学回国人员科研启动基金G200211;浙江省科技攻关项目021102529

在线出版日期：2005-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：390-393