H9N2亚型禽流感病毒原位杂交检测方法的建立

摘要：

根据已知禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)核蛋白(NP)基因序列,选取其中保守区域设计出1对引物,以RT PCR方法扩增出543 bp的NP基因片段,采用地高辛标记制备探针.MDCK细胞人工感染H9N2亚型禽流感病毒后,不同时间取样制备细胞涂片,进行原位杂交,研究了禽流感病毒对MDCK细胞的感染,探讨了原位杂交的条件及其应用于检测AIV感染的可行性.结果显示,感染24 h后,原位杂交可检测出细胞内的病毒RNA,并且杂交信号的强度与感染时间的长短有关.研究表明,原位杂交检测禽流感病毒,不但能很好地表现病毒和细胞的位置关系,而且具有较好的特异性和灵敏性,为禽流感病毒的组织原位杂交检测奠定了实验基础.

关键词：原位杂交、禽流感病毒、MDCK细胞

所属期刊栏目：25

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：湖北省科技攻关项目2004AA202B04

在线出版日期：2005-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：371-373