重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究Ⅰ.ELISA方法的初步建立及其标化

摘要：

以纯化的重组N蛋白作为包被抗原,对各种条件进行优化(如抗原的包被,作用时间及底物的选择),建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的间接ELISA方法.研究结果表明,重组抗原最适包被质量浓度为1 mg/L,最适包被条件为4C过夜,血清稀释度为1:40,待检血清和酶标二抗的反应时间分别为37C30 min和40 min,底物用TMB溶液,37C显色10 min.本研究对ELISA板的蛋白稳定剂、血清稀释液的显色系统和终止液进行了研究.用全病毒进行的阻断试验结果表明,全病毒能够阻断阳性血清与包被重组N蛋白抗原的结合反应.用此方法对几种繁殖障碍性疾病的阳性血清进行检测,均为阴性,无交叉反应,表明建立的ELISA具有很好的特异性.板内和板间重复性试验结果为,同1份血清板内各孔的变异系数和板间各次的变异系数均小于7%,表明本方法的重复性好.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、ELISA、重组N蛋白

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分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技攻关项目2002BA514A-18;国家农业科技成果转化基金02EFN213710657

在线出版日期：2005-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：339-342,345