小鼠H-Y单克隆抗体ELISA检测方法的建立

摘要：

以纯系BALB/c雄性小鼠脾细胞腹腔注射免疫同系雌性小鼠9次,获得的抗血清经雌、雄鼠脾细胞吸收后用于精子细胞毒性试验,测得H-Y抗血清效价为1/160.选取免疫应答最好的雌鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,用精子细胞毒性方法筛选效价较高的细胞株制备腹水,建立优化的ELISA反应条件.优化后的ELISA反应条件为:抗原4 C过夜,加H-Y抗血清37℃反应1 20 min,加HRP-IgG 37 ℃反应30 min,加TMB 25 ℃ 30 min.优化后的ELISA与常规ELISA比较,可以明显降低阴性吸光值,检测灵敏度从1/320上升为1/1 280.

关键词：脾细胞免疫、精子细胞毒性试验、细胞融合、ELISA、H-Y单抗、小鼠

所属期刊栏目：24

分类号：S852.53;S854.43(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2004-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：547-549