表达犬瘟热病毒H基因的重组犬2型腺病毒的构建与鉴定

摘要：

将犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)H基因表达盒克隆入转移质粒pVAXΔE3,构建含CDV H基因表达盒的转移质粒pVAXΔE3LPH,用NruⅠ和SalⅠ分别酶切转移质粒pVAXΔE3LPH和犬2型腺病毒全基因组质粒pPoly2-CAV-2,将CDV H基因表达盒定向克隆入pPoly2-CAV-2质粒中,构建E3区部分缺失的包含CDV H基因表达盒的犬2型腺病毒重组质粒pCAV-2/CDVLPH.AscⅠ和ClaⅠ对pCAV-2/CDVLPH进行双酶切,释放CAV-2/CDVLPH重组基因组,利用脂质体将CAV-2/CDVLPH重组基因组与去除SalⅠ和NruⅠ片段的CAV-2基因组两端片段共转染DK细胞,盲传和重复转染3次,4 d后出现典型CAV-2病变,获得重组病毒CAV-2/CDVLPH.用CDV H基因特异性引物经RT-PCR扩增重组病毒DK细胞培养物,能够扩增出相应的核酸片段,表明CAV-2/CDVLPH在DK细胞繁殖的过程中能够转录CDVLP H的mRNA,重组病毒免疫犬,可以诱导犬产生特异的抗CAV-2 HI抗体和抗CDV中和抗体.

关键词：犬瘟热病毒、H基因、重组、犬2型腺病毒

所属期刊栏目：24

分类号：Q78;S852.65(基因工程（遗传工程）)

资助基金：军队重点项目Z2001095

在线出版日期：2004-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：425-428