10.3969/j.issn.1005-4545.2002.05.003
人Bcl-2乳腺定位表达转基因小鼠的建立
以pCAT、pWB和pWC为原始质粒,构建WAP启动子调控的Bcl-2乳腺组织特异性表达载体pWBS.载体用Bgl Ⅰ+SalⅠ +Pvu Ⅰ酶切,回收3.0kb的基因片段WAP-Bcl-2-SV40PolyA,通过显微注射方法导入C57BL/6J×DBA/2J F1代小鼠受精卵的雄原核内.共注射1 000枚卵,将存活的约600枚卵分别移植至29只假孕母鼠输卵管内,获得仔鼠55只.PCR检测,阳性鼠12只.Southern blot检测,阳性鼠4只,其中公、母鼠各2只,在饲养过程中,2只公鼠均意外死亡.Western blot证实,1只母鼠Bcl-2表达阳性,其F1代的40只小鼠中,有18只呈PCR阳性,其中母鼠8只,在5个月的反复怀孕过程中,未观察到乳房有任何肿瘤或肿块的出现,证实Bcl-2单独在转基因鼠乳腺中表达不会引起转基因鼠乳腺癌的发生.
Bcl-、表达、转基因、小鼠、乳腺
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Q78(基因工程(遗传工程))
中国科学院资助项目97100109
2004-02-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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