旋毛虫新生幼虫差减cDNA文库的构建及其初步筛选

摘要：

利用差减杂交（减法杂交，subtractivehybridization）技术，以旋毛虫新生幼虫（newbornlarvae,NBL）的cDNA作为试验方（tester），以肌幼虫+成虫的cDNA作为驱动方（driver），制备新生幼虫差减cDNA；利用T载体构建NBL差减cDNA文库，获克隆株90个。以试验方的差减cDNA第2次PCR产物+未差减cDNA为试验方探针，以驱动方的差减cDNA第2次PCR产物+未差减cDNA为驱动方探针，在NBL差减cDNA文库中初筛NBL的期特异性克隆，获初筛克隆24个。这些初筛期特异性克隆进一步用Southernblot确认鉴定，获真阳性期特异性克隆2个（NBLSSC1,NBLSSC2）。DNASIS以及Blaster的分析结果显示，这2个克隆为旋毛虫的2个新基因，其中NBLSSC1编码糖蛋白，NBLSSC2编码丝氨酸蛋白酶。本试验为旋毛虫期特异性基因全长序列的调取、分析、鉴定以及强保护性抗原基因的筛选奠定了基础。

关键词：旋毛虫、新生幼虫、期特异性基因、差减文库

所属期刊栏目：21

分类号：S852.731(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金NSFC-39670561,NSFC-39770565;中-法合作项目BT96-12

在线出版日期：2004-02-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：355-358