10.3321/j.issn:1005-2208.2008.03.023
HLA-E基因慢病毒载体构建及其在肝癌HepG2细胞中的表达
目的 构建表达人类白细胞抗原-E(HLA-E)基因慢病毒载体,探讨慢病毒介导HLA-E基因在肿瘤免疫中的意义.方法 2006年10月至2007年11月在中山大学附属第三医院肝移植中心应用pGC-El-GFP-HLA-E慢病毒载体转导肝癌HepG2细胞,检测慢病毒载体的转导效率、细胞内HLA-E信使核糖核酸(mRNA)及蛋白质水平的表达.结果 pGC-El-GFP-HLA-E慢病毒载体转导肝癌HepG2细胞72h的转导效率为(95.0±1.3)%;通过RT-PCR检测24h后细胞内HLA-E mRNA水平是肝癌HepG2细胞的(8.73±1.05)倍,72h后为(293.48±42.01)倍,差异具有统计学意义(P<0.01).细胞免疫组化显示转导HLA-E后细胞内的蛋白水平明显增强.结论 慢病毒栽体系统能够使转导的基因在靶细胞中得到稳定表达,是基因治疗中的理想载体.
慢病毒、人类白细胞抗原-E、基因表达
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R6(外科学)
国家重点基础研究发展计划973计划2003CB515507;国家自然科学基金30571769;中国博士后科学基金20060390753
2008-06-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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