猪萨佩罗病毒VP1蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

摘要：

为了检测猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus,PSV),本研究制备了 PSV衣壳蛋白VP1的多克隆抗体.参照本团队分离毒株(PSVGS01)序列,将VP1基因与原核表达载体pET-32a(+)连接,构建pET-32a-VP1重组质粒,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,获得重组蛋白,利用Ni-NTA亲和层析柱纯化VP1蛋白.用纯化后的VP1蛋白免疫BALB/c小鼠及新西兰大白兔,获得多克隆抗体,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹试验(Western-blot)及免疫荧光试验(IFA)验证其反应性.ELISA结果显示,获得的多克隆抗体的效价均高于1 ∶1 638 400;Western-blot及IFA结果显示,该多克隆抗体能特异性识别PSV感染表达的VP1蛋白,说明该重组蛋白具有良好的反应性.本研究成功表达了 PSV VP1蛋白,并制备了小鼠和家兔多克隆抗体,这为后期建立PSV诊断方法及致病机制的研究奠定了基础.

关键词：猪萨佩罗病毒、VP1蛋白、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：53

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：四川省科技计划重点研发项目;四川省青年学者基金项目;中国农业科学院创新工程项目;中国农业科学院青年英才项目;动物用生物制品创制与应用项目

在线出版日期：2023-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：339-345