禽腺病毒4型环介导等温扩增检测方法的建立

摘要：

为了建立禽腺病毒4型(FAdV-4)的环介导等温扩增(LAMP)检测方法,本研究以FAdV-4 hexon基因高度保守的区域设计LAMP引物,并对反应体系和反应条件进行优化,同时评价该方法的特异性、灵敏度及对临床样品的适用性.结果显示,本研究建立的LAMP方法的最佳反应条件为63℃扩增65min;反应体系中内外引物最佳比例为8 ∶1,MgSO4和dNTP浓度分别为60 mmol/L和10mmol/L;与FAdV-10、FAdV-8b、FAdV-11、NDV、IBDV、AIV-H9、IBV、ILTV、ORT、CIAV、ALV等均无交叉反应,具有良好的特异性;本方法可检测的DNA最低浓度为7.5×10-8ng/μL,灵敏度是传统PCR法的100倍.用本研究建立的LAMP法和PCR法对80份临床样品进行检测,结果相符率为90.5％.上述结果表明,本研究建立的FAdV-4 LAMP检测方法具有准确性高、特异性强、灵敏度高和临床应用可行性强的优点,且结果易于判定,便于现场检测,为FAdV-4提供了一种新的现场诊断方法.

关键词：禽腺病毒4型、hexon、环介导等温扩增、可视化

所属期刊栏目：53

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：云南省应用基础研究计划重点项目;云南国际性高原湿地迁徙型涉禽禽流感等动物疫病监测研究

在线出版日期：2023-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：285-291