非洲猪瘟病毒三重荧光定量PCR鉴别检测方法的建立及应用

摘要：

为建立一种可以同时鉴别ASFV基因Ⅱ型强毒株、基因Ⅰ型弱毒株、I177L基因缺失疫苗毒株的TaqMan三重实时荧光定量PCR检测方法,设计了针对B646L、F778R和I177L基因的特异性引物和探针,并对该方法进行特异性、灵敏性和重复性试验检测,绘制标准曲线,最后用该方法和WOAH推荐的方法对临床样品进行检测和分型.结果显示,本方法特异性和灵敏性好,对B646L、F778R和I177L阳性质粒的最低检测下限分别为1、10和1 copies/μL,说明本方法敏感性高;且该方法在1×100copies/μL～1×107copies/μL模板范围内具有良好的线性关系;组内和组间变异系数均小于2％,重复性和稳定性良好.利用本方法和WOAH推荐的方法分别对临床样品进行检测,两种方法的ASFV阳性率和毒株分型结果一致.综上所述,本方法可以检测基因Ⅱ型强毒株、基因Ⅰ型弱毒株、I177L基因缺失疫苗毒株,为临床ASFV的检测和分型诊断提供了良好的技术支撑.

关键词：非洲猪瘟病毒、荧光定量PCR、基因Ⅱ型、基因Ⅰ型、I177L基因

所属期刊栏目：53

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;北京市博士后工作经费资助项目;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项

在线出版日期：2023-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：277-284