马立克病病毒宿主关闭蛋白pUL41多克隆抗体的制备及应用

摘要：

为了研究马立克病病毒(Marek's disease virus,MDV)宿主关闭蛋白pUL41的表达,制备了特异性多克隆抗体.首先,对MDV pUL41氨基酸序列进行生物信息学分析,发现245～345 aa区段最适合表达抗原.通过PCR扩增部分UL41基因序列,构建原核表达载体pET-UL41s-SUMO,转化感受态大肠杆菌后进行诱导表达,表达产物纯化后免疫日本大耳白兔,获得多克隆抗体.通过间接免疫荧光试验(IFA)和Western-blot检测抗体特异性及评估pUL41蛋白的表达属性.结果显示,菌液经0.8 mmol/L IPTG诱导4 h后,截短蛋白pUL41s大量表达,分子质量为28 ku.间接ELISA测定的抗血清效价达1:128000.IFA和Western-blot试验表明,该抗体特异性良好.用PAA和ACV处理感染的细胞后,pUL41蛋白表达明显受到抑制,表明pUL41蛋白是MDV的晚期基因编码产物.本研究为今后探索MDV pUL41蛋白与宿主分子的潜在相互作用提供了必要的试验材料和数据积累.

关键词：马立克病病毒、病毒宿主关闭蛋白、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：52

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金32060793

在线出版日期：2022-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1294-1301