A型塞内卡病毒的分离与鉴定

摘要：

为了确定2020年河南某猪场水疱性疾病的病因,通过提取发病猪的水疱皮样品的RNA,用RT-PCR方法初步检测,经BHK-21细胞分离培养病毒,进一步用间接免疫荧光试验(IFA)鉴定;利用蚀斑形成试验及病毒一步生长曲线,分析病毒分离株的增殖特性;RT-PCR方法扩增全基因组序列,进而构建基于P1基因的系统进化树.RT-PCR鉴定结果表明,猪场水疱性疾病的样品中只有A型塞内卡病毒(SVA)核酸呈阳性;细胞分离和IFA鉴定结果表明,成功分离到的1株病原为SVA,并命名为SVA/HN/2020,该分离株能够与SVA免疫家兔多抗发生特异性反应;蚀斑试验和病毒一步生长曲线结果表明,该毒株能够在BHK-21细胞层上形成蚀斑,并在感染后的第16小时病毒滴度达到最高为1×109.5 TCID50/100μL;全基因组测序结果表明,该毒株基因组全长7279 bp(不含Poly A),开放阅读框为6546 bp,可编码含2181个氨基酸残基的多聚蛋白;其中P1基因大小为2574 bp,其核苷酸序列分析显示,该分离株与在我国分离的SVA HB/CH/2016和SVA CH/01/2015的同源性最高,为99.6％～99.7％,而与2018-2020年间从广东、广西、河南、河北等地的分离毒株的同源性为95.6％～97.0％.结论:本研究成功分离到1株SVA分离株,为进一步研究SVA致病机制及防控技术研发奠定了基础.

关键词：A型塞内卡病毒、分离鉴定、遗传进化分析

所属期刊栏目：52

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;国家重点研发计划;甘肃省科技重大专项;甘肃省科技重大专项

在线出版日期：2022-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1281-1287