CSFV、PRRSV、PEDV和PRV四重荧光定量PCR方法的建立及应用

摘要：

为了快捷地进行规模化猪场疫病风险评估,建立了一种同时检测猪场环境中猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)的荧光定量PCR方法.根据CSFV 5'UTR基因、PRRSV Nsp2基因、PEDV M基因和PRV gE基因保守区,设计特异性引物和探针,通过优化PCR反应条件,建立了四重荧光定量PCR方法.结果显示,该方法可特异性扩增CSFV、PRRSV、PEDV和PRV,与TGEV、RV、PCV2、PPV、PRV Bartha-K61、JEV、E.coli、S.suis2等病原体无交叉反应,四种病毒的最低检出值为4.62×101 copies/μL,批内及批间变异系数为0.003～0.016.与国标方法相比,两种方法阳性符合率为83.33％～100.00％(182份组织样品).运用该方法检测猪场采集的434份肛拭子、鼻拭子及环境样品,肛拭子和环境样品中PEDV检出率较高,分别为16.53％和11.90％;环境样品中PRV检出率较高,为8.28％.综上结果,此方法为规模化猪场进行疫病风险评估提供了一种有效的技术手段.

关键词：猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪伪狂犬病病毒、荧光定量PCR方法、疫病风险评估

所属期刊栏目：52

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费院级统筹项目;天津市科技计划项目;天津市重大推广项目

在线出版日期：2022-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1259-1267