骆驼科动物中东呼吸综合征冠状病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

摘要：

通过PCR扩增中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)RBD基因片段,将其克隆至真核表达载体pCAGGS中,转染哺乳动物细胞Expi293F,并利用带有StrepTrap标签的亲和柱纯化制备MERS-CoV RBD蛋白,利用SDS-PAGE和Western-blot鉴定纯化后的RBD蛋白.以RBD蛋白为包被抗原,建立骆驼科动物MERS-CoV抗体间接ELISA检测方法.结果显示,MERS-CoV RBD蛋白在Expi293F细胞中以分泌形式表达,纯化后RBD蛋白纯度大于95％;成功建立了骆驼科动物MERS-CoV抗体间接ELISA检测方法.将其初步应用于骆驼、羊驼血清抗体的检测,检测结果与已知血清结果相符合.基于真核表达纯化的高纯度MERS-CoV RBD蛋白,建立了骆驼科动物MERS-CoV抗体间接ELISA检测方法,为骆驼、羊驼等骆驼科动物的MERS-CoV疫苗免疫效果评价、疫病监测等相关研究奠定了基础.

关键词：中东呼吸综合征冠状病毒、真核表达、RBD蛋白、间接ELISA检测

所属期刊栏目：52

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31902306

在线出版日期：2022-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1230-1237