非洲猪瘟病毒结构蛋白CD2v重组核酸疫苗的制备与免疫原性评估

摘要：

构建针对非洲猪瘟病毒(ASFV)CD2v蛋白的重组核酸疫苗并评价其免疫原性.通过PCR扩增目的基因CD2v、LTB、CD2v+LTB,分别连接至pcDNA3.1(-)载体,获得重组表达质粒,经双酶切和测序验证正确后,提取无内毒素质粒转染293T细胞,通过Western-blot验证重组蛋白的表达,并用其注射小鼠进行免疫,对免疫效力进行评价.Western-blot结果表明,构建的重组表达质粒可以在体外表达出目的蛋白.注射小鼠后,外周血CD4+T淋巴细胞的比例升高;ELISA检测发现,与pcDNA3.1(-)和PBS组相比,pcDNA3.1-CD2v+LTB组的INF-γ、IL-2、IL-4水平均极显著升高(P<0.01).pcDNA3.1-CD2v和pcDNA3.1-CD2v+LTB组相比,pcDNA3.1-CD2v+LTB的INF-γ、IL-2水平差异显著(P<0.05),而IL-4含量有差异但不显著,无统计学意义(P>0.05).注射pcDNA3.1-CD2v质粒的小鼠血清效价约为1:12800,注射pcDNA3.1-CD2v+LTB质粒的小鼠血清效价约为1:25600.上述结果表明,本试验构建的重组核酸疫苗pcDNA3.1-CD2v、pcDNA3.1-CD2v+LTB、pcDNA3.1-LTB及抗原CD2v能够显著刺激小鼠的体液免疫和细胞免疫,LTB能够显著提高核酸疫苗的免疫应答.

关键词：非洲猪瘟病毒、CD2v蛋白、大肠杆菌不耐热肠毒素B亚基、核酸疫苗

所属期刊栏目：52

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;贵州省科技创新人才团队项目;贵州省科技支撑计划项目;贵州省科技支撑计划项目

在线出版日期：2022-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1215-1222