旋毛虫Ts-DNase Ⅱ-7蛋白对Caco-2肠上皮细胞屏障的影响

摘要：

为了探索旋毛虫成虫期核酸酶家族Ts-DNase Ⅱ-7蛋白对Caco-2肠上皮细胞屏障模型的作用及机制,本研究采用Transwell细胞培养板构建Caco-2肠上皮细胞屏障,当跨膜电阻值(TEER)达到400 Ω·cm2即判定肠上皮屏障模型构建成功.将试验组分为对照组(control)、PBS组、Ts-DNaseⅡ-7组(5 μg/mL)、阳性对照LPS组(15 μg/mL),作用48 h后,检测跨上皮电阻值(TEER)和对FITC的通透性;Western-blot和荧光定量PCR(qPCR)检测各组细胞Claudin 1、Occludin和ZO-1的蛋白表达水平和mRNA表达水平;通过细胞免疫荧光观察各组紧密连接蛋白的分布情况.结果,与对照组相比,Ts-DNase Ⅱ-7组在第48小时TEER值降低,FITC的通透性增加;Claudin 1、Occludin和ZO-1的蛋白及mRNA的表达水平降低;免疫荧光试验可见细胞间的网状结构荧光不连续.结果表明,旋毛虫成虫期Ts-DNase Ⅱ-7蛋白可破坏肠上皮细胞的物理屏障,有助于旋毛虫实现顺利寄生.

关键词：旋毛虫、Ts-DNase Ⅱ-7、肠屏障、通透性、紧密连接蛋白

所属期刊栏目：52

分类号：S855.9(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;吉林省自然科学基金联合基金项目

在线出版日期：2022-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：351-357