猪水泡病病毒VP1蛋白的原核可溶性表达及优化

摘要：

猪水泡病(swine vesicular disease,SVD)与口蹄疫临床症状相似,临床中很难对该病进行快速、有效的诊断,诊断方法的建立有助于SVD的预防和控制.猪水泡病病毒(SVDV)VP1蛋白是SVD诊断试剂最常用的抗原之一,有效制备VP1抗原是诊断方法建立的关键.本研究将SVDV的VP1基因插入载体pET32a(+),获得重组质粒pET32a(+)-VP1,转化大肠杆菌BL21(DE3)细胞后经诱导表达条件的摸索,确定了 VP1蛋白可溶性表达的最佳条件为:16℃下以0.5 mmol/L的IPTG诱导16 h.通过该条件诱导表达纯化获得了可溶性表达的SVDV VP1蛋白,且经2次柱纯化后获得的蛋白的纯度在90％以上;经Western-blot鉴定,目标蛋白具有很好的反应原性.总之,本研究成功获得了高水平可溶性表达的SVDV VP1蛋白,为SVD检测方法的建立和亚单位疫苗的研发奠定了基础.

关键词：猪水泡病病毒;原核表达;可溶性表达;VP1蛋白

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分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目32072847,32072859,32002272

在线出版日期：2021-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1310-1315