山羊化脓隐秘杆菌LM01株分离鉴定及其毒力基因PLO遗传进化分析

摘要：

为确诊福州某羊场患病山羊皮下脓肿的病因,采集脓液进行细菌分离、形态染色检镜、培养特性观察、生化试验及16S rRNA测序分析,结果分离鉴定出1株革兰阳性、形态不规则、具有β溶血现象的化脓隐秘杆菌,命名为LM01株.用分离菌皮下接种小鼠,能复制出与山羊自然感染相似的皮下脓肿临床病例,半数感染量(ID50)为1.65×107 CFU/mL.病理组织学观察可见皮肤损伤处形成一个大的囊腔,腔内充满大量脓细胞,囊腔与肌层之间有大量成纤维细胞增生及中性粒细胞浸润.毒力基因检测显示分离株至少存在PLO、NanH、NanP、FimA、FimC、FimG等6个毒力基因,其中溶血素PLO是化脓隐秘杆菌最主要的毒力因子,又是宿主保护性抗原.PCR分段扩增PLO基因,得到全长1605 bp,编码534个氨基酸,与GenBank中收录的其他参考株相比,核苷酸和氨基酸同源性分别为95.0％～99.8％和97.0％～99.8％.进化树分析显示,化脓隐秘杆菌分成Group l(牛型)、Group 2(猪型)和Group 3(羊型)3个独立分支,本分离株归属在Group 3(羊型)分支,与重庆2012CQ-ZSH株亲缘关系最近.变异性分析发现,PLO基因仅发生点突变,没有插入或缺失现象;羊型与猪型、牛型相比,存在25处核苷酸特异性位点及5个特异性氨基酸位点:62(N/D)、340(T/A)、355(V/A)、384(F/Y)和470(A/L).药敏试验表明,分离菌对恩诺沙星、强力霉素、阿米卡星等22种药物敏感,对阿奇霉素、复方新诺明、红霉素等6种药物耐药.结果 表明,本次山羊患病的病原菌是化脓隐秘杆菌,本试验为病原学研究提供了参考.

关键词：山羊;化脓隐秘杆菌;分离鉴定;PLO毒力基因;遗传进化分析

所属期刊栏目：51

分类号：S852.619(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划项目;福建农林大学科技创新专项基金项目;福建省自然科学基金项目

在线出版日期：2021-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：1163-1174