蓝舌病病毒VP7蛋白的可溶性纯化及多克隆抗体的制备

摘要：

首先参照GenBank中已发表的基因序列人工合成蓝舌病病毒VP7基因,将其克隆到表达载体pSMK上.选取含有正确开放阅读框的重组质粒pSMK-VP7,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,于16℃利用IPTG诱导剂进行诱导表达,优化表达条件,纯化重组VP7蛋白,免疫新西兰白兔制备VP7多克隆抗体,利用免疫印迹试验对制备的多克隆抗体进行特异性分析.结果 显示,重组VP7蛋白在大肠杆菌中呈可溶性表达,且16h表达量最大,利用镍离子树脂纯化获得了高纯度的VP7蛋白;原核表达的重组VP7以及天然的VP7蛋白均能够与VP7多克隆抗体发生特异性反应.本研究成功实现了重组BTV VP7蛋白的可溶性表达和纯化,并制备了特异性良好的多克隆抗体,为进一步开展BTV的VP7功能研究和建立BTV诊断方法奠定了基础.

关键词：蓝舌病病毒;VP7基因;可溶性表达;纯化;多克隆抗体

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分类号：S852.6594(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目;国家重点研发计划项目

在线出版日期：2021-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1128-1133