猪传染性胃肠炎病毒猪源单链抗体的筛选与鉴定

摘要：

为了获得猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的单链抗体,首先利用噬菌体展示技术,构建猪源噬菌体单链抗体库,然后,通过微孔板筛选法对抗体库进行3轮富集淘筛,并用ELISA检测单链抗体与TGEV的亲和力,对亲和性较高的单链抗体进行基因测序与分析.结果表明,成功构建了猪源噬菌体单链抗体库,其库容为1.89×107CFU/mL,通过Phage ELISA和Fab ELISA筛选得到4株与TGEV具有高亲和力的单链抗体,并通过桑格测序获得了与TGEV亲和性最佳的2株抗体的基因序列.利用在线生物信息学工具对所获得的抗体基因序列进行分析,结果表明,这2株单链抗体基因序列分别由猪源IgG的重链可变区基因(VH)和κ型轻链可变区基因(VL)构成,VH和VL均由3个CDR区和4个FR区构成,说明上述基因序列为完整的猪源TGEV抗体可变区.本研究的结果将为TGEV抗体药物的开发提供必要材料,为TGEV感染仔猪的临床治疗提供新的思路.

关键词：猪源噬菌体抗体库、传染性胃肠炎病毒、单链抗体、噬菌体展示系统

所属期刊栏目：51

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金："十三五"国家重点研发计划项目;国家自然科学基金面上项目

在线出版日期：2021-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：695-704