PERK基因表达干扰对绵羊痘病毒复制影响的研究

摘要：

为探究干扰Hela细胞上PERK基因表达对内质网未折叠蛋白反应(UPRER)的作用及对绵羊瘟病毒(sheep pox virus,SPPV)复制的影响.本研究在HEK293T细胞进行PERK短发夹RNA(shRNA)慢病毒包装并转染Hela细胞,通过实时定量RT-PCR、细胞免疫荧光和Western-blot检测PERK在mRNA和蛋白水平的表达量,同时,用内质网应激激活剂tunicamycin处理shPERK细胞株后检测PERK通路上eIF2α,P-eIF2α,ATF5和ATF4等基因的蛋白表达情况.另外,接种SPPV2于shPERK细胞株,观察干扰PERK表达对病毒复制的影响.结果 ,与空白对照组和阴性对照组相比,慢病毒介导的PERK shRNA成功转柒了Hela细胞;与阴性对照组比较,试验组PERK在mRNA水平和蛋白水平都明显降低,且mRNA水平两者差异极显著(P＜0.001);用tunicamycin处理后,试验组eIF2α,P-eIF2α,ATF4和ATF5基因蛋白表达下调;PERK基因表达干扰后SPPV2的复制减弱,说明PERK在调控SPPV2的复制具有重要作用.以上结果为进一步深入探究UPRER对SPPV2复制的影响及阐明病毒与宿主相互作用的分子机制奠定基础.

关键词：PERK、ER应激、shRNA、绵羊痘病毒

所属期刊栏目：51

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;甘肃省科技计划

在线出版日期：2021-05-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：467-474