10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0063
猪萨佩罗病毒VP1蛋白的原核表达及其间接ELISA方法的建立
为建立猪萨佩罗病毒(PSV)的快速检测方法,本试验以重组VP1蛋白为包被抗原建立了检测PSVIgG的间接ELISA方法.RT-PCR从PSV分离株SHCM2019中扩增VP1基因,将其克隆到原核表达载体pET28a,对重组质粒pET28a-VP1进行原核表达,经Western-blotting检测后,利用VP1重组蛋白建立检测猪血清中PSV IgG抗体的间接ELISA方法.结果 显示,表达的VP1蛋白分子质量约为40 ku,与预期大小相符,Western-blotting表明,重组蛋白与PSV抗体阳性血清具有良好反应原性.以VP1蛋白为抗原建立的ELISA方法与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)及牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的阳性血清均无交叉反应,特异性好;批内和批间的变异系数均小于10%,重复性好.利用建立的间接ELISA方法对95份猪临床血清样本进行检测,阳性率为44.21%.本研究建立的检测方法为PSV的血清学诊断提供了可靠手段.
猪萨佩罗病毒、VP1蛋白、原核表达、间接ELISA
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S852.659.6(动物医学(兽医学))
上海市科技兴农科技攻关计划重点项目;国家重点研发计划
2021-05-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
435-440