中蜂囊状幼虫病毒RT-PCR检测方法的建立与应用

摘要：

为建立中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)核酸的特异性检测方法,以CSBV结构蛋白VP3基因为靶基因,根据GenBank中序列合成1对特异性引物,建立了CSBV RT-PCR检测方法.以CSBV克隆质粒作为模板和蜜蜂6种不同病毒,分别进行特异性、敏感性、重复性试验.结果 显示:所建立的RT-PCR检测方法能扩增出CSBV特异性片段,且不能扩增出蜜蜂以色列急性麻痹病毒、蜜蜂畸翅病毒、蜜蜂急性麻痹病毒、蜜蜂慢性麻痹病毒、黑蜂王台病毒、蜜蜂克什米尔病毒;CSBV阳性质粒最低检测质量浓度为2.82 fg/mL;对CSBV阳性质粒和双蒸水空白对照组重复检测3次,均能扩增出与预期一致的特异性片段.利用该检测方法对从贵州省不同养蜂场采集的100份中华蜜蜂样本进行检测,71份样本为阳性,通过序列比对分析,同源性高达99.16％,进一步证实为CSBV.结果 表明,所建立的CSBV检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,具有良好的实用性.

关键词：中蜂囊状幼虫病毒、RT-PCR、VP3基因、中华蜜蜂

所属期刊栏目：51

分类号：S895.133(养蜂、益虫饲养)

资助基金：基础研究项目;贵州省科技支撑计划;青年科技基金;贵州省百层次创新型人才项目;贵州省科技平台;人才团队计划项目

在线出版日期：2021-04-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：275-280