HSP27慢病毒载体的构建及其稳定表达细胞株的建立

摘要：

热休克蛋白27(HSP27)是一种结构上高度保守的小分子热休克应激蛋白,它可通过与细胞自噬、细胞凋亡和天然免疫信号通路关键因子相互结合参与多种病毒的感染过程.为了便于深入研究HSP27在机体抗感染免疫中的作用,用PCR方法从A549细胞中扩增出HSP27片段,然后经双酶切、连接、转化等步骤获得HSP27的慢病毒表达载体pTRIP-HSP27,将此载体和另一对照载体pTRIP-EGFP分别转染至HEK-293T细胞中,48h后收集慢病毒将其转导至A549细胞,经嘌呤霉素筛选获得过表达HSP27的细胞株A549-HSP27和过表达EGFP的对照细胞株A549-EGFP.最后,经RT-qPCR、Western-blotting、IFA 和细胞活力检测等方法进行鉴定,获得了能稳定表达HSP27的细胞株.

关键词：热休克蛋白27、慢病毒、稳定细胞株

所属期刊栏目：51

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：中央高校基本科研业务费专项;中央高校基本科研业务费专项;国家民族事务委员会中青年英才培养计划;教育部长江学者和创新团队发展计划项目

在线出版日期：2021-03-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：105-112