油酸人工抗原的合成及其单克隆抗体的制备

摘要：

为建立奶牛血清中油酸(OA)含量的免疫学检测方法,将油酸用活泼酯法分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)进行偶联,制备人工抗原和包被原;利用薄层色谱法(TLC)和红外光谱法鉴定人工抗原合成是否成功;用OA-BSA常规免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞进行融合,用间接ELISA筛选出阳性细胞株,再用有限稀释法进行亚克隆;采用小鼠体内诱生法制备腹水,HiTrapProtein G HP纯化柱纯化腹水,并对纯化后的腹水用ELISA检测抗体效价,以及抗体亚型鉴定.结果 表明,TLC监测抗原合成过程中有新物质生成,红外图谱显示OA-BSA波谱形态与BSA相似且拥有OA的特征峰;小鼠血清抗体效价为1:12 800,用ELISA方法筛选出1株细胞G-1,抗体亚型为IgG1型.为建立油酸的免疫学检测方法奠定了基础.

关键词：脂肪肝、油酸、人工抗原、单克隆抗体

所属期刊栏目：50

分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划项目;江苏省高校优势学科建设工程资助项目PAPD

在线出版日期：2020-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1439-1444