布鲁氏菌免疫磁珠qPCR检测方法的建立及应用

摘要：

为建立高效、快速和准确检测布鲁氏菌病原的免疫磁珠qPCR方法,本研究根据GenBank已经发表的布鲁氏菌流产株BRS 19 ku外膜蛋白(Omp19)基因组序列来设计qPCR方法所需要的引物和探针,利用免疫磁珠富集浓缩样品中少量的布鲁氏菌病原,建立了布鲁氏菌免疫磁珠qPCR检测方法.采用qPCR方法对免疫磁珠分离的布鲁氏菌的敏感性、特异性、稳定性及临床应用进行了研究.结果 显示,免疫磁珠qPCR方法检测布鲁氏菌的最低检测限为1×103 CFU/mL.该方法可以扩增不同种型布鲁氏菌,对其他细菌没有发生交叉反应.该方法的批内和批间的变异系数均低于10％,具有较高稳定性.免疫磁珠qPCR方法与常规qPCR的符合率为94.74％,具有良好的吻合性.上述结果表明,本研究建立的免疫磁珠qPCR方法检测布鲁氏菌具有较高的敏感性、特异性和稳定性,为布鲁氏菌病的准确诊断检测和流行病学调查提供技术支撑.

关键词：布鲁氏菌、免疫磁珠、qPCR方法、敏感性

所属期刊栏目：50

分类号：S852.614(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;国家重点研发计划;甘肃省草食畜产业体系项目

在线出版日期：2020-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1243-1248