多重荧光RT-PCR同步检测及鉴别诊断口蹄疫和水泡性口炎

摘要：

本研究建立了可以同时检测和鉴别通用型口蹄疫病毒(FMDV)、新泽西型水泡性口炎病毒(VSV-NJ)和印第安纳型水泡性口炎病毒(VSV-IND)的多重荧光RT-PCR方法,并进行了验证和应用.结果 显示,建立的多重和单一荧光RT-PCR扩增效率E值约100％,R2＞0.999,扩增效果良好,最低检测限可达到约10 copies/μL,方法特异性为100％.FMDV、VSV-NJ和VSV-IND单一荧光RT-PCR与多重荧光RT-PCR之间的相关性系数分别为0.999 5、0.999 8和0.999 4,与单一荧光RT-PCR相比,多重混合对特异性和敏感性均未产生明显干扰.用已知的FMDV和VSV-NJ及VSV-IND阳性核酸19份验证,符合率为100％.经国家口蹄疫参考实验室分别对62份阳性、50份阴性FMDV样品进行验证,结果一致.从100份临床样品中筛查到10份FMDV阳性,未见混合感染,与单一荧光RT-PCR结果相符.本研究建立的多重荧光RT-PCR方法实现了一次检测同时鉴别多重病毒的目的,适用于混合感染水泡性疫病的临床快速筛查.

关键词：多重荧光RT-PCR、口蹄疫、新泽西和印第安纳型水泡性口炎、共感染

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分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：“十三五”国家重点研发计划项目2016YFD0500901,2016YFD0500705

在线出版日期：2020-12-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1236-1242