非洲猪瘟TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

摘要：

为建立检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的快速诊断方法,本研究根据ASFVSY18株p17蛋白的编码基因D117L的保守序列设计并合成引物和探针,建立了基于ASFV p17蛋白的编码基因D117L的TaqMan荧光定量PCR检测方法,并验证其特异性、灵敏性和重复性.结果 显示,本研究建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法的Ct值与标准品在1×109～1×101 copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.998,斜率为-3.192,检测下限为10 copies/μL,且与其他能引起相似症状的猪源病毒无交叉反应.重复性试验结果显示,组间与组内变异系数均小于1.920 7％,重复性好.此方法可用于ASF的早期诊断和ASFV快速检测.

关键词：非洲猪瘟病毒、p17蛋白、D117L基因、实时荧光定量PCR

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分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：广东省重点领域研发计划项目;广东省畜禽疫病防治研究重点实验室开发基金项目

在线出版日期：2020-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：423-429