鹅肾型星状病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立

摘要：

本研究旨在建立一种灵敏、快速检测鹅肾型星状病毒的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法.根据鹅肾型星状病毒的ORF1b保守序列,设计出1对引物,建立了检测该病毒的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法.结果 显示,该方法的Ct值与标准质粒在2.42×104～2.42×109 copies/μL范围内呈良好的线性关系;敏感性高,最低检测限为24.2 copies/μL;该方法特异性强,对禽流感H9N2、鹅副黏病毒、鹅细小病毒、鸭坦布苏病毒均无交叉反应;重复性好,批内和批间变异系数均小于2.5％.运用该方法对动物回归试验中攻毒的雏鹅的各脏器进行检测,结果显示,肾、脾和肝中病毒含量较高,其次是胰腺、肺及肠道,而心和脑中的病毒含量最低.上述结果表明,本研究成功建立了鹅肾型星状病毒的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法,并根据此方法检测出该病毒对肾、脾及肝具有较强的亲嗜性,为该病原致病机制研究奠定了基础.

关键词：鹅肾型星状病毒、实时荧光定量PCR、SYBR Green Ⅰ、病毒分布

所属期刊栏目：50

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏高校优势学科建设工程项目PAPD

在线出版日期：2020-05-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：300-306