传染性法氏囊病病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

摘要：

为了建立传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体间接ELISA检测方法,本研究首先将VP2基因分3段(部分序列重叠),分别为VP2(l～600)、VP2(376～975)和VP2(751～1350),并根据大肠杆菌对密码子的偏爱性进行优化,将优化的3个VP2基因片段分别克隆于原核表达载体pET28a(+)中,转化E.coil Rosetta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western-blot,结果3个重组VP2蛋白均获得了表达.用纯化的3个重组VP2蛋白rVP2(1～600)、rVP2(376～975)和rVP2(751～1350)分别作为包被抗原,建立了IBDV抗体间接ELISA(rVP2-ELISA).用rVP2-ELISA、IDEXX-ELISA(IBDV)及中和试验对96份临床血清样本进行检测,结果显示,3个重组VP2蛋白建立的IBDV抗体间接ELISA检测方法、IDEXX-ELISA(IBDV)与中和试验比较,相对敏感性分别为97.1％、61.8％、58.8％和100％;相对特异性分别为85.5％、82.3％、83.9％和25.8％;符合率分别为89.6％、75.0％、75.0％和52.08％.本研究为研制IBDV抗体间接ELISA检测试剂盒(以重组VP2蛋白作为包被抗原)奠定了基础.

关键词：传染性法氏囊病病毒、抗体、间接ELISA

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分类号：S852.659.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;国家重点研发计划;国家重点研发计划;国家自然科学基金;国家自然科学基金;江苏省自然科学基金;江苏省农业科技自主创新项目

在线出版日期：2020-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：159-167