A型塞内卡病毒VP2蛋白间接ELISA检测方法的建立

摘要：

为建立一种检测塞内卡病毒VP2蛋白的间接ELISA方法,本试验将A型塞内卡病毒(SVA) VP2蛋白作为抗原包被酶标板,采用棋盘式方法优化反应的最佳血清稀释度和抗原包被量,同时对间接ELISA方法的其他反应条件进行了筛选.结果 显示,VP2蛋白包被量为2μ g/mL(1∶1 000稀释);用2％ BSA封闭液稀释标准阳性血清为1∶20;二抗做1∶5 000稀释;TMB底物显色液室温避光显色反应10 min.特异性试验结果显示,同FMDV、PRRSV、CSFV、PRV和APP阳性血清均无交叉反应.此方法对塞内卡病毒阳性血清的敏感性为1∶160.批间、批内重复性试验结果的变异系数均小于10％.对200份猪血清样本分别进行间接荧光抗体免疫方法和间接ELISA方法的检测,结果符合率为95.5％.上述结果表明,该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于塞内卡病毒血清抗体检测和流行病学调查.

关键词：A型塞内卡病毒、抗体、间接ELISA

所属期刊栏目：50

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划课题“潜在入侵的畜禽疫病检测鉴定新技术研究”2016YFD0501102;河北省现代化农业产业技术体系奶牛产业创新团队建设项目1004023

在线出版日期：2020-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：152-158