10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0010
PDCoV和PEAV二重RT-PCR检测方法的建立及初步应用
猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和猪肠道α冠状病毒(PEAV)是两种新发现的猪传染性冠状病毒,临床上均以腹泻症状为主,症状相似,临床上难以快速诊断.为建立一种快速、准确区分PDCoV和PEAV的二重RT-PCR方法,本研究根据PDCoV和PEAV N基因序列,分别设计2对特异性引物,以阳性质粒为模板,对二重RT-PCR反应条件进行优化,并进行特异性、敏感性试验.结果 显示,所建立的方法能够扩增出PDCoV和PEAV的特异性片段,大小分别为690 bp和208 bp,且对猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)无扩增条带;对PDCoV和PEAV的最低检测量分别为5.13×102 copies/μL、4.73×101 copies/μL.对60份临床腹泻样本病料进行检测,结果PDCoV的检出率为21.6%,未检测出PEAV.本研究所建立的二重RT-PCR方法可用于临床流行病学监测,为快速诊断PDCoV和PEAV提供理论依据和技术支持.
猪德尔塔冠状病毒、猪肠道α冠状病毒、二重RT-PCR
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S852.659.6(动物医学(兽医学))
温州市基础性科研项目;温州市基础性科研项目
2020-04-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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141-146