表达EGFP标签的重组血清4型禽腺病毒的构建及评价

摘要：

我国当前流行的禽腺病毒血清4型(FAdV-4)毒株与国外毒株相比存在自然缺失.为了解我国流行的FAdV-4毒株的复制能力和特点以及病毒毒力的增强机制,本研究以我国当前流行的基因组3'端自然缺失株HN/151025为亲本病毒,采用同源重组技术,在HN/151025毒株基因组35430～35431自然缺失位点插入EGFP表达盒,构建带有EGFP标签的重组病毒rHN-△35430-EGFP.获得的重组病毒在荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达,重组病毒在LMH细胞连续传代5代,EGFP基因随病毒的传代而稳定遗传,且EGFP蛋白稳定表达.病毒生长曲线测定结果显示,带有EGFP标签的重组病毒与亲本病毒的生长动力学趋势基本一致,均在接种后第96小时病毒滴度达到高峰,但是重组病毒滴度与亲本病毒差异显著(P＜0.05).对重组病毒感染细胞能力进行评价,结果表明,表达荧光信号的细胞比例从感染后第24小时逐渐增多,至感染后第96小时达到高峰,该结果与病毒生长曲线结果一致.本研究结果表明,FAdV-4病毒基因组3'端可作为标签基因插入位点,为进一步研究病毒复制和感染机制奠定基础.

关键词：禽腺病毒、血清4型、重组病毒、绿色荧光蛋白标签

所属期刊栏目：49

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项

在线出版日期：2019-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：998-1005