表达副鸡禽杆菌外膜蛋白的重组乳酸乳球菌的构建及其免疫原性研究

摘要：

为构建表达副鸡禽杆菌外膜蛋白的重组乳酸乳球菌,本试验按照乳酸乳球菌表达的偏好性,优化合成副鸡禽杆菌外膜蛋白p9的编码碱基序列,将其接入表达载体pNZ8149的多克隆位点并导入食品级乳酸乳球菌NZ3900.将重组乳酸乳球菌灭活后经肌肉注射免疫SPF鸡,免疫后攻毒测定乳酸乳球菌的保护效果,检测血清中IgG抗体和鼻黏膜sIgA抗体水平并检验免疫效果.PCR结果显示,成功构建了含p9片段的重组乳酸乳球菌,Western-blot检测显示,p9片段可在重组乳酸乳球菌内表达.重组菌最佳诱导表达条件:Nisin浓度为20 ng/mL、诱导时间为4h.鸡肌肉注射免疫后可产生p9蛋白特异性的血清IgG和鼻黏膜sIgA抗体.乳酸乳球菌重组疫苗免疫鸡对副鸡禽杆菌攻毒的保护率为60％～80％.结果表明,本研究成功构建了重组乳酸乳球菌pNZ8149-p9/NZ3900,该重组菌作为免疫原免疫鸡,对副鸡禽杆菌攻毒具有较好的免疫保护作用.

关键词：副鸡禽杆菌、重组乳酸乳球菌、IgG、sIgA

所属期刊栏目：48

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划专项YFD0500705;北京市农林科学院改革与发展项目XMS201707,XMS201601

在线出版日期：2018-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1388-1393