鸭γ干扰素在体外细胞中抗鸭肠炎病毒作用的研究

摘要：

为初步探究鸭γ干扰素(IFNγ)抗病毒作用,本研究从鸭胚成纤维细胞(duck embryo fibroblast, DEF)中扩增出鸭γ干扰素(IFNγ) cDNA.将鸭IFNγ基因分别与真核表达载体PCAGG及原核表达载体pET-32a连接,获得重组质粒PCAGG-IFNγ及pET-32a-IFNγ.转染PCAGG-IFNγ于DEF细胞后第24小时,接种鸭肠炎病毒(duck enteritis virus,DEV).同时将pET-32a-IFNγ在大肠杆菌原核表达系统中进行蛋白表达,并用纯化产物处理DEF细胞,处理后第24小时接种DEV,分别采用Western-blot、TCID50测定方法和荧光定量FCR检测重组蛋白IFNγ对DEV复制的影响,并检测细胞中相关干扰素刺激因子(interferonstimulated genes,ISGs)基因包括抗黏液病毒基因(Myxovirus resistance,Mx)、泛素样2'-5'寡聚腺苷酸合成酶基因(2'-5'oligoadenylatesynthetases-like,OASL)、DEAD框蛋白50基因(DEAD-box protein 50,DDX50)的表达情况.结果发现,无论是真核表达的还是原核表达的重组IFNγ均能抑制DEV的复制,并引起ISGs基因表达的上调.本研究结果为进一步探索鸭IFNγ的抗病毒机制提供了基础数据.

关键词：鸭γ干扰素、鸭胚成纤维细胞、鸭肠炎病毒

所属期刊栏目：48

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：黑龙江省青年科学基金;上海市科委科研计划;黑龙江省自然科学基金重点项目;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项

在线出版日期：2018-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1365-1373