黄羽肉鸡胰蛋白酶原的原核表达及其在体内分布的研究

摘要：

本试验对胰蛋白酶原(trypsinogen,TRY)进行原核表达并对其诱导条件、纯化条件进行优化,将纯化后的目的蛋白免疫新西兰白兔,制备兔抗TRY多克隆抗体.利用免疫组织化学法、PCR技术和荧光定量PCR技术分析TRY在不同日龄雌雄黄羽肉鸡体内的分布情况.结果显示,诱导表达重组蛋白的最佳诱导条件为37 ℃ 200r/min,0.8mmol/L IPTG,诱导时间为24 h;亲和层析法纯化蛋白以160 mmol/L的咪唑洗脱效果最好;TRY基因在黄羽肉鸡体内的组织分布具有广泛性,但雌雄黄羽肉鸡各组织的TRY表达量存在差异;TRY基因从1日龄即随着黄羽肉鸡的生长发育表达量也随之增加,在14日龄时,其表达量极显著提高;胰腺组织TRY基因具有性别差异性,在14、35和56日龄,雄性黄羽肉鸡的表达量高于雌性的表达量,差异显著(P＜0.05).上述研究结果可为进一步研究肉鸡胰蛋白酶原结构与功能、肠道消化功能的早期发育过程提供参考.

关键词：胰蛋白酶原、原核表达、多克隆抗体、黄羽肉鸡、组织分布

所属期刊栏目：48

分类号：S852.21(动物医学（兽医学）)

资助基金：福建省鸡产业体系岗位专家经费项目K831392972013-2017

在线出版日期：2018-11-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：1176-1186