维氏气单胞菌胞外产物HisJ基因的克隆与生物信息学分析及原核表达

摘要：

为研究维氏气单胞菌胞外产物His J基因的可能相关功能,扩增His J基因,并通过同源性比较构建His J基因的系统进化树,利用相关软件对HisJ基因编码的蛋白进行生物信息学分析,并对HisJ基因进行原核表达以及表达产物的免疫原性进行检测.结果显示,HisJ基因全长774 bp,编码247个氨基酸,TH0426株HisJ与维氏气单胞菌属同一分支,具有信号肽、跨膜区,属于膜外蛋白,二级结构主要以α螺旋、无规则卷曲为主.经SDS-PAGE分析发现,重组菌可表达出融合性蛋白,并且以10％.的体积接菌、IPTG终浓度为1.0 mmol/L诱导8h表达效果最好.Western-blot分析结果显示,重组HisJ蛋白在大肠杆菌中被成功表达且能被小鼠抗HisJ蛋白血清识别,表明表达的HisJ蛋白具有一定的免疫原性.为进一步对HisJ蛋白的结构功能及与致病性、耐药性关系的研究奠定了基础.

关键词：维氏气单胞菌、胞外产物、HisJ蛋白、原核表达、免疫原性

所属期刊栏目：48

分类号：S852.615(动物医学（兽医学）)

资助基金：吉林省科技厅自然科学研究项目;科技攻关计划重点项目;国家自然科学基金;吉林省教育厅项目

在线出版日期：2018-11-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1152-1159