猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立与应用

摘要：

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是影响世界养猪业的一种重要病原,GP5蛋白是病毒编码的重要免疫保护蛋白.目前,虽然PRRSV抗体检测方法较多,但尚无商品化的GP5蛋白ELISA抗体检测试剂盒.本研究根据高致病性PRRSV BB0907毒株GP5基因特性,删除了 GP5基因跨膜区,并将剩余基因片段优化为大肠杆菌偏嗜性,构建了高效表达的GP5重组蛋白的原核表达载体,制备获得GP5重组蛋白.通过反应条件优化,建立了 PRRSVGP5蛋白间接ELISA(GP5-ELISA)抗体检测方法,其最佳抗原包被浓度为1.0 μg/ mL,血清的最佳稀释度为1 : 100,与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、口蹄疫病毒(FMDV)、脑心肌炎病毒(EMCV)和副猪嗜血杆菌(HPS)等病原抗体均无交叉反应.相对于IDEXX公司PRRSVELISA抗体检测试剂盒,本研究建立的间接GP5-ELISA的敏感性和特异性分别为90.69％和92.86％,两种方法的符合率为91.11％.用本研究建立的间接GP5-ELISA对360份临床猪血清的PRRSV抗体进行检测,抗体阳性率为74.44％.上述结果表明,本研究建立的猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白间接ELISA抗体检测方法具有广阔的应用前景.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、GP5蛋白、间接ELISA

所属期刊栏目：48

分类号：S852.651(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家生猪产业技术体系项目

在线出版日期：2018-11-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1086-1092