猪嵴病毒RPA快速诊断方法的建立和应用

摘要：

根据GenBank中公布的猪嵴病毒(porcine kobuvirus,PKV)基因组序列,设计并合成特异性引物,构建阳性质粒标准品,以阳性标准品为模板建立猪嵴病毒的重组酶聚合酶扩增(RPA)快速检测方法,并对此方法的敏感性、特异性及重复性进行了评价.结果显示,以猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪德尔塔冠状病毒、口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒为模板时均未检测到特异性扩增条带,表明该方法具有良好的特异性;用3.36×107、3.36×106和3.36×105copies/μL三个不同浓度的质粒标准品进行重复试验,均能扩增出特异性条带,表明该方法具有良好的重复性.10倍梯度稀释质粒标准品,此方法检测的最低限度为 3.36×102copies/μL的质粒DNA,表明此方法具有良好的敏感性.利用该方法对208份临床猪粪便样品进行了检测,结果显示,猪嵴病毒阳性率为73.1％,明显高于常规RT-PCR的46.6％,两种方法的符合率为90.2％.上述结果表明,本研究建立的RPA方法可应用于猪嵴病毒的临床诊断及快速检测.

关键词：重组酶聚合酶扩增、猪嵴病毒、快速检测

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分类号：S852.651(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家生猪产业技术体系项目;国家重点研发计划;中国农业科学院兰州兽医研究所统筹项目

在线出版日期：2018-11-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共1页

页码：1079-1079