猪传染性胃肠炎病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

摘要：

本试验用2株抗TGEV重组N蛋白的单抗2C2和2G7与抗TGEV重组N蛋白的多抗血清和抗TGEV全病毒的多抗血清通过抗体两两配对,建立了一种双抗体夹心ELISA检测病原的方法.结果表明,2C2单抗作为包被抗体、N蛋白多抗作为检测抗体时能有效检出TGEV病原.对该ELISA方法的反应条件进行优化,确定最佳反应条件如下:2C2单抗稀释度1∶1 000于37℃包被2h,检测抗体N蛋白多抗稀释度1∶1 000于37℃孵育1h,夹心抗原细胞毒在37℃孵育2h,酶标抗体稀释度1∶2 000在37℃反应30 min,底物于室温显色15 min.所建立的检测方法经过特异性、敏感性和重复性等检测,表明该方法特异性良好,能特异地捕获细胞毒TGEV并和PEDV、PRV没有交叉反应,能检出的最低病毒浓度为13.37μg/mL,批内5个样品的变异系数小于5％,批间5个样品的变异系数小于10％,重复性良好,可以用于TGEV病原的快速检测.

关键词：双抗体夹心ELISA、猪传染性胃肠炎病毒、特异性、敏感性、重复性

所属期刊栏目：48

分类号：S852.659.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：公益技术研究农业项目2016C32072;杭州市农业科研主动设计项目20162012A07

在线出版日期：2018-09-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：946-952